液氮速凍處理對樣本保存的影響

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1.液氮速凍處理對樣本保存的影響 液氮速凍處理的10頭亞洲小車(chē)蝗樣本在12h內均無(wú)存活跡象。說(shuō)明通過(guò)液氮速凍處理能夠使亞洲小車(chē)蝗活體樣本迅速死亡，從而消除因逆境脅迫造成的樣本本身生理生化變化，避免了這些變化對蝗蟲(chóng)樣本基因組DNA提取產(chǎn)生可能的不利影響。

2.不同保存方法對基因組 DNA提取影響亞洲小車(chē)蝗經(jīng)基因組DNA提取后，用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測結果見(jiàn)圖1～3。由圖可見(jiàn)，液氮速凍后保存和無(wú)水乙醇保存的樣本提取的基因組DNA電泳條帶清晰、無(wú)拖尾且亮度高，說(shuō)明得到的DNA濃度較大；直接冷凍保存的樣本提取的DNA電泳檢測結果顯示條帶整齊、無(wú)拖尾，但是亮度較低，說(shuō)明得到的DNA濃度較??；蝗蟲(chóng)干標本提取的基因組DNA電泳檢測顯示條帶不清楚，并有明顯拖尾現象，有的甚至看不到條帶，說(shuō)明干制標本保存會(huì )導致蝗蟲(chóng)基因組DNA發(fā)生嚴重降解，會(huì )對下一步基因擴增、分子標記等分子生物學(xué)試驗的進(jìn)行造成不利的影響。

3.冷凍脅迫對基因組DNA提取影響對比液氮速凍后保存和直接冷凍保存兩種樣本保存方法對蝗蟲(chóng)基因組DNA提取結果可以看出，液氮速凍后保存的樣本提取的基因組DNA明顯比直接冷凍保存的樣本基因組DNA的電泳條帶亮度高，說(shuō)明液氮速凍后保存得到的DNA的濃度較大。由此得出，樣本在受到冷凍脅迫死亡的過(guò)程中會(huì )發(fā)生基因組DNA降解現象，使提取得到的DNA 的濃度較小。所以，液氮速凍后保存更適合昆蟲(chóng)基因組學(xué)的研究。