產(chǎn)品列表 / products
細胞和胚胎是生物學(xué)實(shí)驗中需要大量的超低溫冷藏的樣品,常規的方法有深冷冰箱儲存法,但是壓縮機不知什么時(shí)候會(huì )罷工,所以,采用液氮罐的液氮超低溫儲存方法,就成了業(yè)內使用*為廣泛的方法和技術(shù)。給您說(shuō)說(shuō)幾個(gè)關(guān)于液氮罐保存細胞和胚胎的知識點(diǎn)。
一、在細胞培養過(guò)程中的使用
細胞培養的一般過(guò)程,主要包括準備、取材、培養和凍存復蘇4步。為保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般用一 196℃液氮溫度,將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲基亞砜或甘油)的培養基,以一定的冷卻速度凍存,*終保存于液氮罐中。在極低的溫度下,細 胞保存的時(shí)間幾乎是無(wú)限的。
目前美國標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)液氮凍存有3200個(gè)已經(jīng)過(guò)鑒定的細胞系(1992),其中包括來(lái)自正常人和各種疾病患者的皮膚成纖維細胞系和來(lái)自不同物種的近75個(gè)雜交瘤細胞株。
二、胚胎冷凍保存技術(shù)
胚胎冷凍保存技術(shù)是指在低溫條件下利用低溫保護劑保存胚胎的一門(mén)技術(shù)。這一技術(shù)是20世紀后半葉隨著(zhù)人工授精技術(shù)廣泛應用而產(chǎn)生的,目前已成為了現代生 命科學(xué)研究*的手段之一。動(dòng)物胚胎的冷凍保存原理就是因為低溫降低了胚胎內的變質(zhì)反應速度,溫度越低,胚胎保存時(shí)間就越長(cháng)。
目前已研究出多種胚胎冷凍保存方法,包括慢速冷凍法、快速冷凍法、一步冷凍法、直接移植冷凍法和玻璃化冷凍法等。其中玻璃化冷凍法的步驟如下:
①將胚胎在室溫下放人25%玻璃化溶液(VS液)中預處理15min;
②將預處理后的胚胎放在高濃度(75%一90%)的VS液中保存20—40min;
③將經(jīng)過(guò)兩步抗凍劑處理的胚胎直接投入液氮中保存。
此外還可以用液氮罐保存菌種、疫苗、骨組織、精子等物質(zhì),均可達到很好的長(cháng)期存儲的效果。
常用胚胎和細胞保存液氮罐為廣口翻蓋型液氮罐,如YDS-110-290F型 YDS-100-200F型 里面配多層凍存管提籃,用來(lái)保存細胞等樣品。大型液氮罐一罐可保存七八千只凍存管,對于細胞保存,也是一個(gè)超大的容器。