液氮罐中的菌種活化

液氮罐中的菌種(Bacterial species)活化是怎么回事？
菌（fungus)種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養基中培養， 逐級擴大培養是為了 得到純而壯的培養物，即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。液氮罐一般可分為液氮貯存罐、液氮運輸罐兩種。 貯存罐主要用于室內液氮的靜置貯存，不宜在工作狀態(tài)下作遠距離運輸使用； 液氮運輸罐為了滿(mǎn)足運輸的條件，作了專(zhuān)門(mén)的防震設計。其除可靜置貯存外，還可在充裝液氮狀態(tài)下，作運輸使用，但也應避免劇烈的碰撞和震動(dòng)。液氮罐使用過(guò)程中要經(jīng)常檢查?？梢杂醚塾^(guān)測也可以用手觸摸外殼，若發(fā)現外表掛霜，應停止使用；特別是頸管內壁附霜結冰時(shí)不宜用小刀去刮，以防頸管內壁受到破壞，造成真空不良，而是應將液氮取出，讓其自然融化。菌種發(fā)酵又稱(chēng)酦酵有一般需要 2-3 代的復壯過(guò)程，因為保存時(shí)的條件往往和培養時(shí)的條件不相同，所 以要活化,讓菌種逐漸適應培養環(huán)境(environment) 要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。自增壓液氮罐
目前(International)國內常用的 菌種保存方法包括(bāo kuò)： 定期移植法、 液體石蠟法、 沙土管法、 真空冷凍干燥法、 80℃ 冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。
對于不同的保存方式活化的方式也不同：
1 定期移植法的菌種復蘇較簡(jiǎn)單，直接轉接即可;
2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時(shí)，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上， 生長(cháng)繁殖（fán zhí）后，再重新轉接一次;
3 沙土管法保存菌種(Bacterial species)在復蘇時(shí)，在無(wú)菌(意思：沒(méi)有活菌)條件下打開(kāi)沙土管，取部分沙土粒于適 宜的斜面培養(to c*te)基上， 長(cháng)出菌落后再轉接一次。 或取沙土粒于適宜的液體(liquid)培養基中， 增殖培養后再轉接斜面;
4 真空冷凍(freezing)干燥法保存菌種在復蘇時(shí)先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿 管頂部燒熱， 用無(wú)菌(意思：沒(méi)有活菌)棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷 子頸部輕叩一下，敲下已開(kāi)裂的安瓿管的頂端，用無(wú)菌水或培養液溶解菌塊，使用(use)無(wú)菌吸管移入新鮮培養基上，進(jìn)行適溫培養;
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種(Bacterial species)復蘇時(shí)，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應 立即放置 38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動(dòng)。直到內部結冰全部溶解為 止，約需 50 秒-100 秒。開(kāi)啟安瓿管或塑料凍存管，將網(wǎng)站內容物移**適宜的培養基 上進(jìn)行培養 6 液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似，從液氮罐(Liquid)中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在 38℃-40℃水浴中快速復蘇并 適當搖動(dòng)。直到內部結冰全部溶解為止，一般約需 50 秒-100 秒。開(kāi)啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移**適宜的培養基上進(jìn)行培養。
總結一下菌種活化需要以下幾個(gè)步驟（procedure)：
**配置菌（fungus)種適宜生長(cháng)(Grow)的培養基
第二將菌（fungus)種從保藏狀態(tài)恢復到室溫狀態(tài)，比如將冷凍(freezing)的菌種解凍第三將通過(guò)操作將保藏的菌種接種到培養基中培養，此步驟稱(chēng)為菌種復壯
第四步挑選培養基茁壯的菌落，挑選其中部分菌落接種到新的培養基中培養，重復此步驟（procedure) 2-3 次，從而得到生長(cháng)(Grow)良好的菌落
經(jīng)過(guò)這四個(gè)步驟就到達將菌種從保藏狀態(tài)活化的目的
有同學(xué)已經(jīng)說(shuō)的很專(zhuān)業(yè)(zhuān yè)了，我就給你說(shuō)些簡(jiǎn)單實(shí)用的。不知道你出于何種目的要進(jìn)行活化。 如果你是用凍存管保存的菌株進(jìn)行活化， 取出 2 顆小珠放在適宜的固 體培養(to c*te)基上，合上蓋讓小珠在平皿上滾動(dòng)，適宜條件培養就可以了。長(cháng)出一個(gè)菌 落，你再繁殖就可以了。如果你是凍干粉的菌種(Bacterial species)，準備適宜的液體培養基，少少一點(diǎn)點(diǎn)粉末接種就可以了，根據此菌種一般液體培養所需時(shí)間，大概在 36-48h， 你還可以在觀(guān)察(Observed)到液體渾濁、試管底部有沉淀（precipitation）時(shí)(沉淀者也可能為原本死亡的細 菌)，取 100 微升液體涂抹(smear)在固體培養基上。 一般的話(huà)，復蘇的菌種需要重復幾次復壯。自增壓液氮罐